Описание
Анализ на антитела IgG к специфическим антигенам Боррелия методом LineBlot является высокоточным подтверждающим тестом для диагностики хронической и поздней стадии болезни Лайма. IgG к боррелии достигают максимального уровня через 4–6 месяцев после заражения и сохраняются длительно – отражая как активную хроническую инфекцию, так и перенесённую. Принципиальное преимущество этого теста перед скрининговым ИФА состоит в многоантигенном анализе: исследование одновременно определяет антитела к 14 специфическим антигенам боррелии – включая VlsE всех трёх видов возбудителя, Borrelia burgdorferi, afzelii и garinii, циркулирующих на территории Украины и Европы.
Именно тройное VlsE является ключевым диагностическим маркером: присутствие антител хотя бы к одному из трёх VlsE-антигенов указывает на высокую вероятность болезни Лайма. Метод иммуноблотинга обеспечивает значительно более высокую специфичность по сравнению с ИФА – устраняя ложноположительные результаты скрининга. МЦ «Альтернатива» применяет этот анализ при хронических симптомах боррелиоза и при подтверждении положительного скринингового ИФА на IgG.
Болезнь Лайма и роль IgG в диагностике хронической стадии
Болезнь Лайма является бактериальной инфекцией, вызываемой спирохетами рода Borrelia. В Европе и на территории Украины циркулируют три основных вида возбудителя – Borrelia burgdorferi, Borrelia afzelii и Borrelia garinii – что принципиально для диагностики: тест, охватывающий все три вида, значительно более информативен, чем тест на один.
- стадии болезни и кинетика антител. IgM появляются в первые дни болезни и достигают максимума к 1,5 месяцам – после чего снижаются. IgG начинают вырабатываться несколько позже, достигают максимума через 4–6 месяцев и сохраняются длительно – нередко годами. IgG являются маркером хронической, поздней или перенесённой инфекции
- хроническая болезнь Лайма. При отсутствии своевременного лечения боррелия распространяется по организму. Развивается хронический Лайм-артрит с поражением крупных суставов. Нейроборрелиоз – паралич лицевого нерва, менингит, нарушения памяти, онемение конечностей. Поражение сердечной мышцы и органов зрения. Хроническая стадия трудно поддаётся лечению и может приводить к стойкой инвалидизации
- почему IgG LineBlot точнее скринингового ИФА. ИФА является чувствительным, но нередко даёт ложноположительные результаты при других спирохетальных инфекциях, аутоиммунных заболеваниях и ряде вирусных инфекций. LineBlot определяет антитела к каждому антигену боррелии отдельно – ложноположительная реакция одновременно к нескольким специфическим антигенам практически невозможна
Антигены в составе анализа и их диагностическое значение
VlsE Ba, VlsE Bb, VlsE Bg – высокоочищенные рекомбинантные антигены VlsE Borrelia afzelii, burgdorferi и garinii соответственно. Наиболее диагностически значимые антигены в составе теста. VlsE активно экспрессируется при активной инфекции всех трёх видов боррелии. Присутствие антител хотя бы к одному из трёх VlsE-антигенов является сильным серологическим аргументом в пользу болезни Лайма. Именно тройное VlsE делает этот LineBlot особенно ценным на территориях с циркуляцией нескольких видов возбудителя.
- LBa, LBb – липидные антигены Borrelia afzelii и Borrelia burgdorferi. Специфические липопротеины наружной мембраны боррелии – их выявление в сочетании с VlsE повышает достоверность диагноза.
- p83 Ba – белок мембранных везикул Borrelia afzelii высокой молекулярной массы. Антитела к p83 характерны преимущественно для поздней и хронической стадии инфекции
- p41 Bg – нативный флагелин Borrelia garinii. Белок жгутикового аппарата – один из первых антигенов иммунного ответа. Оценивается в совокупности с другими антигенами из-за возможных перекрёстных реакций с флагелинами других бактерий
- p39 Bg (BmpA) – нативный белок связывания металлов Borrelia garinii. Специфичный антиген боррелии – его выявление при хроническом боррелиозе является дополнительным диагностическим аргументом
- p25 (OspC Borrelia garinii) – наружный поверхностный белок С. Ранний антиген, появляющийся в острой стадии – при IgG может сохраняться и в хронической фазе
- p58, p21, p19, p18 – дополнительные специфические белки боррелии. Их совместное выявление в спектре антигенов повышает специфичность диагноза и позволяет более полно охарактеризовать иммунный ответ при хроническом боррелиозе
Показания к назначению анализа на антитела IgG к специфическим антигенам Borrelia методом LineBlot
Анализ назначается инфекционистом, неврологом, ревматологом, терапевтом или педиатром.
Основные показания:
- положительный или сомнительный скрининговый ИФА на IgG к боррелии – подтверждающий тест
- симптомы хронической или поздней болезни Лайма – Лайм-артрит, нейроборрелиоз, поражение сердца
- боли в суставах неясной этиологии при наличии эпидемиологического анамнеза
- неврологические симптомы – паралич лицевого нерва, онемение конечностей, нарушения памяти – при подозрении на нейроборрелиоз
- профилактическое обследование лиц из группы риска – рыбаки, охотники, работники лесного хозяйства, туристы в эндемичных районах
Интерпретация результатов анализа на антитела IgG к специфическим антигенам Borrelia методом LineBlot
По каждому из 14 антигенов отдельно указывается значение интенсивности окрашивания.
- 0–11 – отрицательный результат по антигену. Антитела IgG к данному антигену не выявлены в диагностически значимом количестве
- 12–18 – сомнительный результат. Требует повторного исследования через 2–4 недели или дополнительных методов диагностики
- 19–256 – положительный результат. Антитела IgG к данному антигену выявлены
Клиническая интерпретация спектра. Наиболее весомым диагностическим критерием является выявление антител к VlsE Ba, VlsE Bb или VlsE Bg – присутствие антител хотя бы к одному из трёх VlsE-антигенов указывает на высокую вероятность болезни Лайма. Положительные результаты по нескольким антигенам одновременно значительно повышают специфичность диагноза. Положительный p41 при отрицательных остальных антигенах интерпретируется с осторожностью.
Часто задаваемые вопросы об анализе на антитела IgG к специфическим антигенам Borrelia методом LineBlot
- Почему в анализе исследуется VlsE трёх разных видов боррелии? На территории Украины и Европы циркулируют три вида боррелии – burgdorferi, afzelii и garinii. VlsE каждого вида имеет специфические различия – антитела к VlsE одного вида могут не реагировать с VlsE другого. Тройное VlsE охватывает всех возможных возбудителей и значительно повышает чувствительность диагностики.
- Если только один антиген положительный – это диагноз боррелиоза? Зависит от того, какой именно антиген. Положительный VlsE даже при одном виде боррелии является весомым диагностическим аргументом. Положительный только p41 при отрицательных остальных требует осторожной интерпретации. Окончательное решение принимает врач с учётом клинической картины.
- Нужен ли предварительный ИФА к боррелии перед LineBlot IgG? Стандартный алгоритм предполагает ИФА первым шагом. Но при выраженных симптомах хронического боррелиоза и чётком эпидемиологическом анамнезе возможно непосредственное назначение LineBlot как более информативного теста.
- Могут ли IgG к боррелии оставаться положительными после успешного лечения? Да – IgG сохраняются в крови длительно после успешной терапии. Полное исчезновение антител не является обязательным критерием выздоровления. Критерием успешного лечения является клиническое выздоровление, а не серологическая нормализация.
Анализ на антитела IgG к специфическим антигенам Borrelia методом LineBlot является высокоточным подтверждающим тестом при диагностике хронической и поздней болезни Лайма – охватывая 14 специфических антигенов боррелии, включая VlsE всех трёх видов возбудителя. Тройное VlsE является ключевым диагностическим маркером – присутствие антител хотя бы к одному из трёх VlsE-антигенов указывает на высокую вероятность болезни Лайма. Метод обеспечивает значительно более высокую специфичность по сравнению со скрининговым ИФА. МЦ «Альтернатива» применяет этот анализ при хронических симптомах боррелиоза и при подтверждении положительного скринингового ИФА на IgG к боррелии.
Материал для исследования – венозная кровь. Специальной подготовки не требуется.
Метод исследования – иммуноблотинг (LineBlot). Высокоочищенные рекомбинантные и нативные антигены боррелии нанесены на мембрану отдельными линиями – специфические антитела IgG выявляются к каждому антигену индивидуально с количественной оценкой интенсивности реакции.
Срок выполнения – 4 рабочих дня.