Опис
Аналіз на антитіла IgG до специфічних антигенів Боррелія методом LineBlot є високоточним підтверджуючим тестом для діагностики хронічної та пізньої стадії хвороби Лайма. IgG до борелії досягають максимального рівня через 4-6 місяців після зараження і зберігаються тривалий час – відображаючи як активну хронічну інфекцію, так і перенесену. Принципова перевага цього тесту перед скринінговим ІФА полягає в багатоантигенному аналізі: дослідження одночасно визначає антитіла до 14 специфічних антигенів борелії – включаючи VlsE всіх трьох видів збудника, Borrelia burgdorferi, afzelii та garinii, що циркулюють на території України та Європи.
Саме потрійне VlsE є ключовим діагностичним маркером: присутність антитіл хоча б до одного з трьох VlsE-антигенів указує на високу ймовірність хвороби Лайма. Метод імуноблотингу забезпечує значно вищу специфічність порівняно з ІФА – усуваючи хибнопозитивні результати скринінгу. МЦ «Альтернатива» застосовує цей аналіз при хронічних симптомах бореліозу та при підтвердженні позитивного скринінгового ІФА на IgG.
Хвороба Лайма та роль IgG у діагностиці хронічної стадії
Хвороба Лайма є бактеріальною інфекцією, що викликається спірохетами роду Borrelia. У Європі та на території України циркулюють три основні види збудника – Borrelia burgdorferi, Borrelia afzelii та Borrelia garinii – що є принциповим для діагностики: тест, який охоплює всі три види, значно інформативніший, ніж тест на один.
- стадії хвороби та кінетика антитіл. IgM з’являються в перші дні хвороби і досягають максимуму до 1,5 місяців – після чого знижуються. IgG починають вироблятися дещо пізніше, досягають максимуму через 4-6 місяців і зберігаються тривалий час – нерідко роками. IgG є маркером хронічної, пізньої або перенесеної інфекції
- хронічна хвороба Лайма. За відсутності своєчасного лікування борелія поширюється по організму. Розвивається хронічний Лайм-артрит з ураженням великих суглобів. Нейробореліоз – параліч лицьового нерва, менінгіт, порушення пам’яті, оніміння кінцівок. Ураження серцевого м’яза та органів зору. Хронічна стадія важко піддається лікуванню і може призводити до стійкої інвалідизації
- чому IgG LineBlot точніший за скринінговий ІФА. ІФА є чутливим, но нерідко дає хибнопозитивні результати при інших спірохетальних інфекціях, аутоімунних захворюваннях та низці вірусних інфекцій. LineBlot визначає антитіла до кожного антигену борелії окремо – хибнопозитивна реакція одночасно до кількох специфічних антигенів практично неможлива
Антигени у складі аналізу та їхнє діагностичне значення
VlsE Ba, VlsE Bb, VlsE Bg – високоочищені рекомбінантні антигени VlsE Borrelia afzelii, burgdorferi та garinii відповідно. Найбільш діагностично значущі антигени у складі тесту. VlsE активно експресується при активній інфекції всіх трьох видів борелії. Присутність антитіл хоча б до одного з трьох VlsE-антигенів є сильним серологічним аргументом на користь хвороби Лайма. Саме потрійне VlsE робить цей LineBlot особливо цінним на територіях із циркуляцією кількох видів збудника.
- LBa, LBb – ліпідні антигени Borrelia afzelii та Borrelia burgdorferi. Специфічні ліпопротеїни зовнішньої мембрани борелії – їх виявлення в поєднанні з VlsE підвищує достовірність діагнозу
- p83 Ba – білок мембранних везикул Borrelia afzelii високої молекулярної маси. Антитіла до p83 характерні переважно для пізньої та хронічної стадії інфекції
- p41 Bg – нативний флагелін Borrelia garinii. Білок джгутикового апарату – один із перших антигенів імунної відповіді. Оцінюється в сукупності з іншими антигенами через можливі перехресні реакції з флагелінами інших бактерій
- p39 Bg (BmpA) – нативний білок зв’язування металів Borrelia garinii. Специфічний антиген борелії – його виявлення при хронічному бореліозі є додатковим діагностичним аргументом
- p25 (OspC Borrelia garinii) – зовнішній поверхневий білок С. Ранній антиген, що з’являється в гострій стадії – при IgG може зберігатися і в хронічній фазі
- p58, p21, p19, p18 – додаткові специфічні білки борелії. Їхнє спільне виявлення в спектрі антигенів підвищує специфічність діагнозу та дозволяє більш повно охарактеризувати імунну відповідь при хронічному бореліозі
Показання до призначення аналізу на антитіла IgG до специфічних антигенів Borrelia методом LineBlot
Аналіз призначається інфекціоністом, неврологом, ревматологом, терапевтом або педіатром.
Основні показання:
- позитивний або сумнівний скринінговий ІФА на IgG до борелії – підтверджуючий тест;
- симптоми хронічної або пізньої хвороби Лайма – Лайм-артрит, нейробореліоз, ураження серця;
- болі в суглобах неясної етіології за наявності епідеміологічного анамнезу;
- неврологічні симптоми – параліч лицьового нерва, оніміння кінцівок, порушення пам’яті – при підозрі на нейробореліоз;
- профілактичне обстеження осіб із групи ризику – рибалки, мисливці, працівники лісового господарства, туристи в ендемічних районах.
Інтерпретація результатів аналізу на антитіла IgG до специфічних антигенів Borrelia методом LineBlot
По кожному з 14 антигенів окремо вказується значення інтенсивності забарвлення.
- 0–11 – негативний результат по антигену. Антитіла IgG до даного антигену не виявлені в діагностично значущій кількості
- 12–18 – сумнівний результат. Потребує повторного дослідження через 2-4 тижні або додаткових методів діагностики
- 19–256 – позитивний результат. Антитіла IgG до даного антигену виявлені
Клінічна інтерпретація спектра. Найбільш вагомим діагностичним критерієм є виявлення антитіл до VlsE Ba, VlsE Bb або VlsE Bg – присутність антитіл хоча б до одного з трьох VlsE-антигенів указує на високу ймовірність хвороби Лайма. Позитивні результати по кількох антигенах одночасно значно підвищують специфічність діагнозу. Позитивний p41 при негативних інших антигенах інтерпретується з обережністю.
Часті запитання про аналіз на антитіла IgG до специфічних антигенів Borrelia методом LineBlot
- Чому в аналізі досліджується VlsE трьох різних видів борелії? На території України та Європи циркулюють три види борелії – burgdorferi, afzelii та garinii. VlsE кожного виду має специфічні відмінності – антитіла до VlsE одного виду можуть не реагувати з VlsE іншого. Потрійне VlsE охоплює всіх можливих збудників і значно підвищує чутливість діагностики.
- Якщо тільки один антиген позитивний – це діагноз бореліозу? Залежить від того, який саме антиген. Позитивний VlsE навіть при одному виді борелії є вагомим діагностичним аргументом. Позитивний тільки p41 при негативних інших потребує обережної інтерпретації. Остаточне рішення приймає лікар з урахуванням клінічної картини.
- Чи потрібен попередній ІФА до борелії перед LineBlot IgG? Стандартний алгоритм передбачає ІФА першим кроком. Але при виражених симптомах хронічного бореліозу та чіткому епідеміологічному анамнезі можливе безпосереднє призначення LineBlot як більш інформативного тесту.
- Чи можуть IgG до борелії залишатися позитивними після успішного лікування? Так – IgG зберігаються в крові тривалий час після успішної терапії. Повне зникнення антитіл не є обов’язковим критерієм одужання. Критерієм успішного лікування є клінічне одужання, а не серологічна нормалізація.
Аналіз на антитіла IgG до специфічних антигенів Borrelia методом LineBlot є високоточним підтверджуючим тестом при діагностиці хронічної та пізньої хвороби Лайма – охоплюючи 14 специфічних антигенів борелії, включаючи VlsE всіх трьох видів збудника. Потрійне VlsE є ключовим діагностичним маркером – присутність антитіл хоча б до одного з трьох VlsE-антигенів указує на високу ймовірність хвороби Лайма. Метод забезпечує значно вищу специфічність порівняно зі скринінговим ІФА. МЦ «Альтернатива» застосовує цей аналіз при хронічних симптомах бореліозу та при підтвердженні позитивного скринінгового ІФА на IgG до борелії.
Матеріал для дослідження – венозна кров. Спеціальної підготовки не потрібно.
Метод дослідження – імуноблотинг (LineBlot). Високоочищені рекомбінантні та нативні антигени борелії нанесені на мембрану окремими лініями – специфічні антитіла IgG виявляються до кожного антигену індивідуально з кількісною оцінкою інтенсивності реакції.
Термін виконання – 4 робочих дні.
Статті про діагностику та лікування Хвороби Лайма
