Описание
Генотипирование HCV – определение генетического варианта (генотипа) вируса гепатита С методом ПЦР. Это не скрининговый тест: его назначают только после подтверждения активной инфекции (положительная РНК HCV в крови) – для планирования лечения. Генотип вируса был критически важен для выбора схемы и длительности противовирусной терапии в эпоху интерферон-содержащих режимов. Сегодня, в эпоху пан-генотипических ПППД, значение генотипирования несколько снизилось, однако оно по-прежнему используется при выборе оптимального режима и сроков лечения.
Генотипы HCV: чем они различаются
Вирус гепатита С существует в нескольких генетических вариантах – генотипах, которые обозначаются цифрами от 1 до 8, и подтипах (1a, 1b, 2a, 2b, 3a и т.д.). Генотипы различаются по нуклеотидной последовательности примерно на 30-35% и имеют разные географическое распределение, клинические особенности и ответ на терапию.
- Генотип 1 – наиболее распространённый в мире (около 46% всех случаев). В Украине и России доминирует подтип 1b («европейский»). Исторически считался наиболее трудно поддающимся лечению при интерферон-содержащих режимах – требовал 48 недель терапии при частоте УВО около 40-50%. С появлением ПППД это различие практически исчезло.
- Генотип 2 – встречается реже (около 9% случаев). При интерфероновой терапии отвечал лучше всего – 80-90% УВО за 24 недели. При современных ПППД различия между генотипами минимальны.
- Генотип 3 – второй по частоте (около 30% случаев). Особенности: высокий риск развития стеатоза (жировой болезни) печени даже при невысокой вирусной нагрузке; более быстрое прогрессирование фиброза; более высокий риск гепатоцеллюлярной карциномы по сравнению с другими генотипами. При некоторых схемах ПППД требует более длительного курса (16 вместо 12 недель) при наличии цирроза.
- Генотипы 4, 5, 6 – встречаются преимущественно в Африке, Азии и на Ближнем Востоке, в Украине редки. Данный анализ определяет генотипы 1, 2 и 3 – наиболее актуальные для украинского региона.
Зачем определять генотип сегодня
С появлением пан-генотипических препаратов (велпатасвир/софосбувир, глекапревир/пибрентасвир) необходимость генотипирования перед каждым назначением снизилась – эти препараты эффективны при всех генотипах. Тем не менее генотипирование остаётся клинически значимым в следующих ситуациях:
- выбор оптимальной схемы лечения – для ряда режимов терапии (например, леднипасвир/софосбувир) генотипирование определяет применимость схемы (только для генотипа 1 и 4)
- определение длительности терапии – при генотипе 3 с циррозом ряд схем требует удлинения курса до 16-24 недель
- прогноз прогрессирования – генотип 3 ассоциирован с более быстрым фиброзом и более высоким риском гепатоцеллюлярной карциномы, что влияет на интенсивность мониторинга
- реинфекция после лечения – при повторном заражении определение генотипа позволяет установить, тот же это вирус или другой
- оценка резистентности – при выборе схемы после неэффективного первичного лечения
- требования страховых компаний и программ государственного обеспечения – ряд программ обеспечения ПППД требует генотипирования как условия для назначения
Показания к назначению генотипирования HCV
- подтверждённая активная HCV-инфекция (положительная качественная ПЦР) перед назначением противовирусной терапии
- планирование оптимальной схемы и длительности лечения
- повторное заражение после успешного лечения – для подтверждения, что это реинфекция, а не рецидив
- эпидемиологические исследования – изучение распределения генотипов в популяции
Метод генотипирования: как работает ПЦР Real-Time
Генотипирование методом ПЦР Real-Time основано на том, что разные генотипы HCV имеют специфические нуклеотидные последовательности. Тест использует наборы праймеров и зондов, специфичных для каждого генотипа. По тому, какая реакция даёт сигнал, определяется генотип вируса. Метод быстрый (результат через 1-2 дня), достаточно точный и не требует высокой вирусной нагрузки для проведения.
Ограничение: данный тест определяет генотипы 1, 2 и 3. При подозрении на редкие генотипы (4, 5, 6) – необходимо уточнённое секвенирование.
Генотип и прогноз при гепатите С в МЦ «Альтернатива»
В МЦ «Альтернатива» генотипирование HCV назначается в рамках обследования перед началом противовирусной терапии. Результат учитывается при планировании как медикаментозного лечения, так и сопроводительной программы поддержки печени. При генотипе 3 – с учётом его ассоциации с более быстрым фиброзом – интенсивность мониторинга состояния печени и программа детоксикации и поддержки выстраиваются более активно. Программа восстановления печени при вирусных гепатитах в МЦ «Альтернатива» включает озонотерапию, детоксикацию и висцеральную терапию – независимо от генотипа. Лечение хронического гепатита С в центре всегда проводится комплексно: противовирусная терапия + программа восстановления функции очищения организма.
Как правильно подготовиться к анализу
- генотипирование проводится только при подтверждённой активной инфекции (положительная качественная ПЦР)
- специальной подготовки не требуется
- для получения результата необходима достаточная вирусная нагрузка – при очень низкой нагрузке (менее 1000 МЕ/мл) генотипирование может быть технически затруднено
Часто задаваемые вопросы о генотипировании HCV
- Обязательно ли делать генотипирование гепатита С перед лечением? При использовании пан-генотипических схем (велпатасвир/софосбувир, глекапревир/пибрентасвир) – формально нет, они эффективны при всех генотипах. Однако для выбора оптимальной длительности и при наличии цирроза – генотипирование желательно.
- Может ли генотип гепатита С измениться со временем? Нет. Генотип вируса постоянен на протяжении всей инфекции. Изменение генотипа возможно только при реинфекции другим штаммом.
- Один человек может быть заражён двумя генотипами гепатита С одновременно? Да, смешанная инфекция возможна, особенно у лиц с множественными факторами риска (употребление инъекционных наркотиков). При смешанной инфекции тест может выявить оба генотипа.
Материал для исследования: плазма крови из вены
Метод исследования: ПЦР Real-Time, качественное определение генотипа
Определяемые генотипы: 1, 2, 3
Срок готовности: 5 рабочих дня