Описание
Анализ на хеликобактер методом ПЦР Real-Time является наиболее точным из доступных методов диагностики инфекции Helicobacter pylori – выявляя ДНК бактерии непосредственно в биологическом материале с чувствительностью, недостижимой для серологических методов и сопоставимой с инвазивными исследованиями. В отличие от анализов на антитела – IgG, IgA, IgM – ПЦР определяет не иммунный ответ организма на бактерию, а саму бактерию. Это принципиальное различие: антитела могут сохраняться после успешного лечения, могут не выработаться при иммунодефиците – ПЦР лишена этих ограничений.
Метод применяется как при первичной диагностике, так и для контроля эффективности эрадикационной терапии – при этом результат не зависит от состояния иммунной системы пациента, давности инфицирования или стадии инфекционного процесса. Материалом для исследования может служить кал, биоптат слизистой желудка и другие биологические образцы – что делает метод применимым как без гастроскопии, так и в её рамках. МЦ «Альтернатива» назначает ПЦР-диагностику хеликобактера при симптомах гастрита и язвенной болезни – как самостоятельно, так и в составе комплексного гастроэнтерологического обследования.
Что такое ПЦР Real-Time и почему этот метод точнее серологических
ПЦР – полимеразная цепная реакция – является молекулярно-биологическим методом, выявляющим специфические участки ДНК возбудителя в исследуемом образце. Real-Time – формат ПЦР с регистрацией результата в режиме реального времени – позволяет не только выявить присутствие ДНК, но и оценить её количество при необходимости.
Принцип метода. В образце биологического материала – кале или биоптате – выделяется ДНК. С помощью специфических праймеров, комплементарных уникальным участкам генома хеликобактера, проводится многократное копирование целевого фрагмента. При наличии ДНК бактерии в образце – копирование происходит, результат положительный. При её отсутствии – реакция не идёт, результат отрицательный.
Почему ПЦР точнее серологических методов:
Серологические методы – IgG, IgA, IgM – зависят от нормального иммунного ответа пациента. При иммунодефиците, в ранней фазе заражения или после успешного лечения антитела могут давать ложные результаты. ПЦР не зависит от иммунного статуса – она выявляет ДНК независимо от того, выработал ли организм антитела. Чувствительность ПЦР при исследовании кала составляет 90–95%, биоптата – до 98%.
Качественное определение. Данный формат анализа даёт однозначный ответ – ДНК хеликобактера выявлена или не выявлена. Это достаточно для диагностики присутствия инфекции и для контроля эффективности лечения.
Показания к назначению анализа ПЦР (кал, биоптат из слизистой желудка и др) к хеликобактеру
Анализ назначается гастроэнтерологом, терапевтом или педиатром.
Первичная диагностика:
- симптомы гастрита – тяжесть после еды, изжога, тошнота, боли в эпигастрии, вздутие
- симптомы дуоденита или язвенной болезни – голодные боли, ночные боли в верхней части живота
- неприятный запах изо рта без стоматологической причины
- обследование при выявлении хеликобактера у близких родственников
Уточняющая диагностика:
- отрицательный серологический результат при наличии симптомов – ПЦР выявляет инфекцию там, где антитела не информативны
- иммунодефицит – при котором серологические тесты ненадёжны
- необходимость подтверждения перед назначением эрадикационной терапии
Контроль эффективности лечения:
- оценка успешности эрадикационной терапии – ПЦР является одним из наиболее точных методов контроля; проводится не ранее чем через 4 недели после окончания курса
Материал для исследования и особенности взятия
- кал. Наиболее доступный материал – не требует инвазивных процедур. Собирается в стерильный контейнер. Отражает актуальное присутствие бактерии в желудочно-кишечном тракте
- биоптат слизистой желудка. Берётся при гастроскопии – обеспечивает наивысшую чувствительность метода. Позволяет одновременно провести гистологическое исследование и оценить состояние слизистой
- другие биологические материалы. При необходимости исследование может проводиться из других образцов – в зависимости от клинической задачи
- подготовка. За 2 недели до исследования желательно исключить приём антибиотиков и препаратов висмута. За 3–5 дней – ингибиторов протонной помпы, снижающих концентрацию бактерии в образце и потенциально влияющих на результат
Интерпретация результатов анализа ПЦР (кал, биоптат из слизистой желудка и др) к хеликобактеру
Анализ является качественным – возможны два результата.
- положительный результат. ДНК Helicobacter pylori выявлена – бактерия присутствует в исследуемом материале. При наличии симптомов гастрита или язвы – основание для назначения эрадикационной терапии. При контроле после лечения – эрадикация не достигнута, требуется коррекция схемы терапии
- отрицательный результат. ДНК хеликобактера не выявлена. При первичной диагностике – инфекция маловероятна. При контроле после лечения – эрадикация успешна. При сохраняющихся симптомах и отрицательном ПЦР – следует рассмотреть другие причины гастрита
Преимущество ПЦР при контроле лечения. Серологические методы при контроле лечения оценивают динамику снижения антител – процесс медленный и неоднозначный. ПЦР даёт чёткий ответ уже через 4 недели после окончания курса – ДНК бактерии есть или нет.
Часто задаваемые вопросы об анализе ПЦР (кал, биоптат из слизистой желудка и др) к хеликобактеру
- Чем ПЦР лучше анализа кала на антиген для диагностики хеликобактера? Оба метода являются прямыми – выявляют бактерию, а не антитела. ПЦР выявляет ДНК возбудителя, анализ на антиген – его белковые молекулы. По чувствительности методы сопоставимы. ПЦР имеет преимущество при необходимости исследования биоптата и при необходимости одновременного определения чувствительности к антибиотикам в расширенном формате.
- Можно ли сдавать ПЦР во время приёма ингибиторов протонной помпы? Нежелательно – эти препараты снижают концентрацию бактерии в желудке и могут повлиять на результат при исследовании кала. При невозможности отмены – результат интерпретируется с учётом этого ограничения.
- Через сколько дней после заражения ПЦР становится положительной? ПЦР становится положительной при наличии достаточного количества бактерии в образце – как правило, через 1–2 недели после заражения. В отличие от серологических методов, не требует времени на выработку антител.
- Выявляет ли ПЦР резистентность хеликобактера к антибиотикам? Стандартный качественный ПЦР только подтверждает или исключает наличие бактерии. Определение резистентности – устойчивости к кларитромицину, метронидазолу и другим антибиотикам – проводится расширенным форматом ПЦР или культуральным методом при биопсии.
- Нужна ли гастроскопия при положительном ПЦР кала? Не обязательно при типичной клинической картине без тревожных симптомов. Гастроскопия показана при симптомах тревоги – снижении веса, дисфагии, кровотечении, анемии – и при отсутствии ответа на эрадикационную терапию.
ПЦР Real-Time на хеликобактер является наиболее точным неинвазивным методом диагностики инфекции Helicobacter pylori – выявляя ДНК бактерии независимо от иммунного статуса пациента и стадии инфекционного процесса. Метод применим как при первичной диагностике, так и для контроля эффективности лечения – давая чёткий ответ уже через 4 недели после окончания эрадикационной терапии. МЦ «Альтернатива» назначает ПЦР-диагностику хеликобактера в составе комплексного гастроэнтерологического обследования – при симптомах гастрита, дуоденита и язвенной болезни.
Материал для исследования – кал, биоптат слизистой желудка и другие биологические материалы в зависимости от клинической задачи. Специальной подготовки не требуется; желательно исключить антибиотики за 2 недели, ингибиторы протонной помпы за 3–5 дней.
Метод исследования – ПЦР Real-Time (полимеразная цепная реакция в режиме реального времени). Выявляет специфические участки ДНК Helicobacter pylori в исследуемом образце с чувствительностью до 95–98%.
Срок выполнения – 4 рабочих дня.
