Бореліоз, антитіла IgG + IgM, методом LineBlot

Комплексний аналіз на антитіла IgG та IgM до специфічних антигенів Borrelia методом LineBlot є найбільш повним серологічним дослідженням для діагностики хвороби Лайма на будь-якій стадії – об’єднуючи в одному тесті всі переваги роздільних IgM та IgG LineBlot. Одночасне визначення обох класів антитіл до повного спектра специфічних антигенів трьох видів борелії – burgdorferi, afzelii та garinii – охоплює всі стадії інфекції в одному дослідженні: IgM виявляють гостру та ранню стадію, IgG – хронічну та пізню.

Метод імуноблотингу забезпечує значно вищу специфічність порівняно зі скринінговим ІФА – визначаючи антитіла до кожного антигену окремо та усуваючи хибнопозитивні результати. Саме поєднання двох класів антитіл та багатоантигенного аналізу робить цей тест оптимальним при невідомій стадії інфекції, при сумнівному ІФА та за необхідності отримання максимально повної серологічної картини. МЦ «Альтернатива» застосовує цей комплексний LineBlot при симптомах хвороби Лайма на будь-якій стадії та при підтвердженні позитивного скринінгового ІФА.

Чому одночасне визначення IgM та IgG є принципово важливим

Хвороба Лайма є багатостадійним захворюванням із принципово різними імунологічними маркерами на кожній стадії. Тест, який охоплює лише один клас антитіл, неминуче пропускає частину клінічних ситуацій.

• обмеження роздільних тестів. IgM LineBlot є інформативним у перші 1–2 місяці від появи симптомів – при хронічному бореліозі IgM нерідко вже не визначаються. IgG LineBlot є інформативним при хронічній та пізній стадії – але при гострій інфекції в перші тижні IgG ще не досягли діагностично значущих рівнів. При невідомій тривалості симптомів – що є типовою клінічною ситуацією – роздільний тест може дати хибнонегативний результат
• перевага комплексного тесту. Одночасне визначення IgM та IgG охоплює весь спектр стадій в одному дослідженні. Поєднання класів антитіл дозволяє оцінити не лише факт інфікування, а й стадію: переважання IgM указує на гостру інфекцію, переважання IgG – на хронічну, обидва класи позитивні одночасно – перехідний період або загострення
• три види борелії в одному тесті. На території України та Європи циркулюють усі три основні види збудника. Включення антигенів Borrelia burgdorferi, afzelii та garinii – зокрема VlsE всіх трьох видів у складі IgG – забезпечує максимальне покриття можливих збудників

Антигени у складі аналізу на антитіла IgG та IgM до специфічних антигенів Borrelia методом LineBlot

Антигени IgG:

• VlsE Ba, VlsE Bb, VlsE Bg – високоочищені рекомбінантні антигени VlsE трьох видів борелії. Ключові діагностичні маркери – присутність антитіл хоча б до одного з трьох VlsE вказує на високу ймовірність хвороби Лайма при хронічній стадії
• LBa, LBb – специфічні ліпідні антигени Borrelia afzelii та burgdorferi. Їх виявлення в поєднанні з VlsE підвищує достовірність діагнозу
• p83 Ba – білок мембранних везикул Borrelia afzelii високої молекулярної маси. Характерний для пізньої та хронічної стадії
• p41 Bg – нативний флагелін Borrelia garinii. Один із ранніх антигенів імунної відповіді – оцінюється в сукупності з іншими через можливі перехресні реакції
• p39 Bg (BmpA) – специфічний білок зв’язування металів Borrelia garinii. Додатковий маркер хронічного бореліозу
• p25 (OspC Borrelia garinii) – зовнішній поверхневий білок С. Ранній антиген, що зберігається і при хронічній фазі
• p58, p21, p19, p18 – додаткові специфічні білки борелії, які підвищують специфічність діагнозу при спільному виявленні

Антигени IgM:

• VlsE Bb – рекомбінантний антиген VlsE Borrelia burgdorferi. Один із перших високоспецифічних маркерів гострої інфекції
• p41 – нативний флагелін Borrelia afzelii. Ранній антиген з урахуванням можливих перехресних реакцій
• p39 (BmpA) – нативний BmpA Borrelia afzelii. Специфічний маркер гострої інфекції
• p25 Ba, p25 Bb, p25 Bg (OspC трьох видів) – зовнішній поверхневий білок С Borrelia afzelii, burgdorferi та garinii. Провідний антиген гострої стадії – активно експресується при передачі від кліща та в перші тижні інфекції. Потрійне OspC охоплює всі види збудника і значно підвищує чутливість ранньої діагностики

Показання до призначення комплексного аналізу на антитіла IgG та IgM до специфічних антигенів Borrelia методом LineBlot

Аналіз призначається інфекціоністом, неврологом, ревматологом, терапевтом або педіатром.

Основні показання:

• позитивний або сумнівний скринінговий ІФА на антитіла до борелії – підтверджуючий тест при будь-якому результаті ІФА;
• симптоми хвороби Лайма при невідомій тривалості – мігруюча еритема, артрит, нейробореліоз, втома, головний біль;
• підозра на бореліоз при тривалому укусі кліща в анамнезі – незалежно від давності;
• контроль ефективності антибактеріальної терапії;
• уточнення стадії інфекції за наявності симптомів невідомої давності.

Перевага перед роздільними тестами. При невідомій стадії хвороби Лайма комплексний IgM+IgG LineBlot є методом вибору – він охоплює всі стадії і не потребує клінічного припущення про тривалість інфекції.

Інтерпретація результатів комплексного аналізу на антитіла IgG та IgM до специфічних антигенів Borrelia методом LineBlot

По кожному антигену окремо для IgM та IgG – значення інтенсивності забарвлення.

• 0–11 – негативний результат по антигену. Антитіла до даного антигену не виявлені
• 12–18 – сумнівний результат. Потребує повторного дослідження через 2–3 тижні або додаткових методів
• 19–256 – позитивний результат. Антитіла до даного антигену виявлені

Клінічна інтерпретація за поєднанням класів:

IgM позитивний + IgG негативний – гостра або рання інфекція в перші 1–2 місяці. IgM позитивний + IgG позитивний – перехідний період або загострення хронічної інфекції. IgM негативний + IgG позитивний – хронічна, пізня або перенесена інфекція. Обидва негативні при симптомах у перші 2 тижні – можлива рання інфекція до формування антитіл, рекомендується повторне дослідження.

Ключовий діагностичний маркер. Позитивний VlsE – особливо за кількома видами борелії одночасно – є найбільш вагомим серологічним аргументом на користь хвороби Лайма незалежно від класу антитіл.

Часті запитання про комплексний аналіз на антитіла IgG та IgM до специфічних антигенів Borrelia методом LineBlot

• У чому принципова перевага цього тесту перед роздільними IgM та IgG LineBlot? Комплексний тест охоплює всі стадії хвороби Лайма в одному дослідженні – не потребує клінічного припущення про тривалість інфекції. При невідомій стадії роздільний тест може бути хибнонегативним – комплексний цього не допускає.
• Чи потрібен попередній ІФА перед цим тестом? Стандартний алгоритм передбачає ІФА першим кроком. При виражених симптомах та чіткому епідеміологічному анамнезі можливе безпосереднє призначення комплексного LineBlot як більш інформативного та специфічного тесту.
• Якщо IgM позитивний, а IgG негативний – це гострий бореліоз? Так – це класична картина гострої або ранньої інфекції в перші 1–2 місяці. IgG ще не досягли діагностично значущих рівнів. За наявності симптомів та епідеміологічного анамнезі – це підстава для негайного початку лікування.
• Чи може тест бути негативним за наявності мігруючої еритеми? Так – у перші 2 тижні після зараження антитіла ще не сформувалися. Мігруюча еритема є самостійною клінічною підставою для діагнозу та початку лікування без очікування серологічного підтвердження.
• Чи потрібно повторювати тест після лікування? За необхідності серологічного контролю – повторне дослідження через 3–6 місяців після лікування оцінює динаміку антитільного профілю. Повне зникнення IgG не є обов’язковим критерієм одужання.

Комплексний аналіз на антитіла IgG+IgM до специфічних антигенів Borrelia методом LineBlot є найбільш повним серологічним інструментом діагностики хвороби Лайма – одночасно охоплюючи гостру та хронічну стадії через спільне визначення обох класів антитіл до повного спектра антигенів трьох видів борелії. Це робить тест методом вибору при невідомій стадії інфекції та за необхідності отримання максимально повної серологічної картини. МЦ «Альтернатива» застосовує цей аналіз при симптомах хвороби Лайма будь-якої тривалості та при підтвердженні позитивного скринінгового ІФА.

Матеріал для дослідження – венозна кров. Спеціальної підготовки не потрібно.

Метод дослідження – імуноблотинг (LineBlot). Високоочищені рекомбінантні та нативні антигени борелії нанесені на мембрану окремими лініями – специфічні антитіла IgM та IgG виявляються до кожного антигену індивідуально.

Термін виконання – 4 робочих дні.

Статті про діагностику та лікування Хвороби Лайма