Опис
Визначення каріотипу пацієнта – цитогенетичне дослідження, яке показує повний хромосомний набір клітин організму: їх кількість, форму та структуру. Аналіз дозволяє виявити кількісні та структурні аномалії хромосом, що лежать в основі спадкових захворювань, порушень репродуктивної функції та патологій внутрішньоутробного розвитку. Дослідження проводять методом культивування лімфоцитів периферичної крові з подальшим диференційним фарбуванням хромосом.
Що таке каріотип людини
Каріотип – це індивідуальний набір хромосом соматичної клітини, впорядкований за розміром, формою та розташуванням центромери. У здорової людини каріотип включає 46 хромосом: 22 пари аутосом (нестатевих хромосом) та одну пару статевих хромосом – XX у жінок та XY у чоловіків. Зміна кількості або структури хромосом може призводити до безпліддя, звичного невиношування вагітності, вад розвитку плода та низки спадкових синдромів.
Хромосомний набір формується на етапі запліднення і залишається незмінним упродовж усього життя людини, тому однократне каріотипування в будь-якому віці дає достовірну та постійну інформацію про генетичний статус пацієнта.
Методи визначення каріотипу пацієнта
Для дослідження хромосомного набору застосовують кілька цитогенетичних та молекулярно-генетичних методів, які різняться за розрізняльною здатністю, термінами виконання та спектром виявлюваних порушень.
Стандартне каріотипування методом GTG-фарбування
Базовий метод визначення каріотипу – GTG-фарбування (диференційне фарбування хромосом трипсином та барвником Гімза, від англ. G-bands by Trypsin using Giemsa). Лімфоцити крові культивують, зупиняють поділ клітин на стадії метафази, після чого хромосоми фарбують та аналізують під мікроскопом. Метод виявляє як числові (анеуплоїдії), так і великі структурні перебудови хромосом.
FISH-метод флуоресцентної гібридизації
Флуоресцентна гібридизація in situ (FISH, від англ. Fluorescence In Situ Hybridization – флуоресцентна гібридизація на місці) використовує мічені ДНК-зонди для виявлення конкретних хромосомних ділянок. Метод швидший за стандартне каріотипування, але досліджує лише ті хромосоми або локуси, для яких підібрано зонд, тому застосовується як уточнювальний.
Хромосомний мікроматричний аналіз
Хромосомний мікроматричний аналіз (ХМА, англ. chromosomal microarray analysis – аналіз на мікроматриці) – молекулярний метод, що виявляє мікроделеції та мікродуплікації розміром у десятки тисяч пар нуклеотидів, які не видно при стандартному каріотипуванні. ХМА не визначає збалансовані транслокації та інверсії, тому його розглядають як доповнення до класичного каріотипування, а не заміну.
| Метод | Що виявляє | Роздільна здатність | Особливості |
|---|---|---|---|
| Стандартне каріотипування (GTG) | Анеуплоїдії, великі транслокації, делеції, інверсії | 5-10 млн пар нуклеотидів | Базовий метод, оцінює весь хромосомний набір |
| FISH-метод флуоресцентної гібридизації | Конкретні хромосоми або локуси | Залежить від зонда | Швидкий, але точковий аналіз |
| Хромосомний мікроматричний аналіз (ХМА) | Мікроделеції, мікродуплікації | Від 50-100 тис. пар нуклеотидів | Не виявляє збалансовані перебудови |
Показання до призначення аналізу на визначення каріотипу
- Безпліддя – відсутність вагітності у пари впродовж року регулярного статевого життя без контрацепції
- Звичне невиношування вагітності – два і більше мимовільних переривання вагітності в анамнезі
- Підготовка до екстракорпорального запліднення (ЕКЗ) та інтрацитоплазматичної ін’єкції сперматозоїда (ІКСІ)
- Порушення сперматогенезу – азооспермія та виражена олігозооспермія у чоловіків
- Первинна або вторинна аменорея невідомого походження у жінок
- Обтяжений сімейний анамнез щодо хромосомних захворювань або вад розвитку
- Затримка психомоторного та фізичного розвитку дитини, множинні вроджені вади розвитку
- Порушення формування статі та неоднозначна будова зовнішніх статевих органів у новонародженого
- Планування донорських репродуктивних програм, коли потрібне підтвердження генетичного здоров’я учасника програми
Норми каріотипу людини
| Стать | Нормальний каріотип | Опис |
|---|---|---|
| Жіноча | 46,XX | 46 хромосом, дві Х-хромосоми |
| Чоловіча | 46,XY | 46 хромосом, одна Х- і одна Y-хромосома |
Інтерпретація результату аналізу на визначення каріотипу
Відхилення каріотипу поділяють на числові та структурні. Числові аномалії (анеуплоїдії) – це зміна кількості хромосом: трисомія (зайва хромосома в парі) або моносомія (відсутність однієї хромосоми з пари). Структурні аномалії стосуються будови самої хромосоми: транслокації (перенесення ділянки однієї хромосоми на іншу), делеції (втрата ділянки), дуплікації (подвоєння ділянки), інверсії (розворот ділянки хромосоми на 180 градусів) та кільцеві хромосоми.
Окремо виділяють мозаїцизм – стан, за якого в організмі одночасно присутні клітинні лінії з різним хромосомним набором. Збалансовані структурні перебудови часто не впливають на здоров’я носія, але підвищують ризик безпліддя, невиношування вагітності та хромосомних порушень у нащадків.
| Синдром | Типовий каріотип | Основні клінічні прояви |
|---|---|---|
| Синдром Дауна | 47,XX(XY),+21 | Трисомія за 21-ю парою хромосом, розумова відсталість, характерні риси обличчя |
| Синдром Едвардса | 47,XX(XY),+18 | Трисомія за 18-ю парою хромосом, множинні вади розвитку |
| Синдром Патау | 47,XX(XY),+13 | Трисомія за 13-ю парою хромосом, тяжкі вади розвитку |
| Синдром Клайнфельтера | 47,XXY | Додаткова Х-хромосома у чоловіків, азооспермія, безпліддя |
| Синдром Шерешевського-Тернера | 45,X | Відсутність однієї Х-хромосоми у жінок, низькорослість, первинна аменорея |
Лікування безпліддя та невиношування вагітності при відхиленнях каріотипу в МЦ «Альтернатива»
Саме по собі визначення каріотипу не піддається лікуванню, оскільки хромосомний набір людини незмінний, однак виявлені відхилення допомагають лікарям МЦ «Альтернатива» точно визначити причину репродуктивних порушень і підібрати індивідуальну тактику ведення пацієнта. Жінкам з відхиленнями в результатах аналізу допомагають розібратися з діагностикою хвороб, які можуть призводити до безпліддя у жінок, і скоригувати супутні порушення репродуктивного здоров’я.
Для пар, які планують вагітність, в МЦ «Альтернатива» проводиться підготовка подружньої пари до вагітності та штучного запліднення методами ЕКЗ і ІКСІ, в рамках якої результати каріотипування враховуються при побудові індивідуального плану. Оцінити вихідний стан репродуктивної системи дозволяє аналіз роботи жіночої репродуктивної системи на Комплексі Медичному Експертному. Як додатковий метод відновлення репродуктивної функції пацієнтам пропонується лікування жіночої та чоловічої безплідності із застосуванням гірудотерапії. Необхідну супутню діагностику можна пройти, використовуючи доступні в клініці лабораторні методи діагностики у гінекології. Додатково лікарі центру супроводжують пацієнтів у рамках програми гінекології та планування вагітності, спрямованої на підвищення шансів зачати дитину.
Підготовка до аналізу на визначення каріотипу
- Спеціальна підготовка не потрібна – кров можна здавати в будь-який час доби
- Голодування необов’язкове, але бажано здавати кров натще або через 3-4 години після останнього прийому їжі
- Переливання крові впродовж останніх 3 місяців перед дослідженням слід обов’язково повідомити лікарю, оскільки це може спотворити результат
- Перенесені гострі інфекції та курс антибактеріальної терапії бажано вказати у направленні на аналіз
- Прийом лікарських препаратів на момент здачі аналізу слід заздалегідь обговорити з лікарем
Матеріал для дослідження: венозна кров.
Метод дослідження: цитогенетичний аналіз культивованих лімфоцитів периферичної крові методом диференційного GTG-фарбування хромосом.
Термін готовності: 14-21 робочий день, оскільки для отримання метафазних пластинок необхідне культивування клітин у лабораторних умовах.
Часті запитання про аналіз на визначення каріотипу
Чи боляче здавати аналіз на визначення каріотипу
Дослідження не відрізняється від звичайного забору венозної крові та супроводжується лише короткочасним дискомфортом при проколі вени.
Чи можна перездати аналіз на каріотип, якщо результат сумнівний
Хромосомний набір людини не змінюється впродовж життя, тому при технічно коректному дослідженні повторне здавання зазвичай не потрібне, а спірні випадки уточнюють додатковими методами – FISH або хромосомним мікроматричним аналізом.
Чи потрібно здавати аналіз на каріотип обом партнерам
При безплідді, невиношуванні вагітності та підготовці до ЕКЗ каріотипування рекомендують проходити обом партнерам, оскільки носієм збалансованої хромосомної перебудови може бути як жінка, так і чоловік.
Скільки разів у житті потрібно здавати аналіз на каріотип
Оскільки хромосомний набір закладається при заплідненні і залишається незмінним, каріотипування зазвичай проводять один раз у житті, і його результат зберігає діагностичну цінність упродовж усіх наступних років.
Здати аналіз на визначення каріотипу в МЦ «Альтернатива»
Визначення каріотипу пацієнта – інформативне цитогенетичне дослідження, яке допомагає виявити хромосомні причини безпліддя, невиношування вагітності та порушень розвитку, а результат зберігає свою актуальність на все життя.
Здати аналіз на визначення каріотипу в МЦ «Альтернатива» можна після консультації лікаря, який допоможе визначити показання до дослідження, пояснить отриманий результат і запропонує подальшу тактику обстеження та підготовки до вагітності з урахуванням індивідуальних особливостей пацієнта.