Герпес вірус 3 типу (Varicella Zoster), ДНК, ПЛР Real-Time (плазма крові, слина, сеча, вміст папул)

Герпесвірус 3 типу (Varicella Zoster), ПЛР Real-Time – найбільш точний метод прямого виявлення вірусу вітряної віспи, який виявляє його ДНК безпосередньо в біологічному матеріалі. На відміну від серологічних аналізів на антитіла – IgA, IgM, IgG – які оцінюють імунну відповідь організму на вірус, ПЛР виявляє сам збудник.

Ця принципова відмінність визначає ключову перевагу методу: він є інформативним з перших днів захворювання – до того як імунна система встигла виробити детектований рівень антитіл. При нетиповому перебігу вітряної віспи, при атипових висипаннях, схожих на інші екзантеми, при оперізувальному герпесі без явних везикул – ПЛР дає однозначну відповідь там, де клінічна картина та серологія не дозволяють поставити діагноз упевнено.

Широкий спектр біоматеріалів – плазма крові, слина, сеча, вміст папул – забезпечує можливість дослідження залежно від клінічної ситуації та доступності матеріалу.

У МЦ «Альтернатива» ПЛР на VZV застосовується при діагностиці гострих та атипових форм VZV-інфекції у складі комплексного обстеження.

Переваги ПЛР перед серологічними методами при діагностиці VZV

Серологічні методи – визначення IgA, IgM, IgG – є цінними діагностичними інструментами при VZV-інфекції. Але вони мають принципові обмеження, які ПЛР усуває.

• серологічне «вікно»: антитіла з’являються із затримкою відносно початку інфекції. IgA виробляються найраніше – але й вони можуть не визначатися в перші ж дні. ПЛР виявляє ДНК вірусу з моменту його активної реплікації – фактично з першого дня клінічних проявів
• нетипові випадки без характерного висипу: при вітряній віспі у пацієнтів з імунодефіцитом висипання можуть бути атиповими – поодинокими, дрібними, що нагадують інші дерматози. Діагноз лише за клінікою є ускладненим. ПЛР вмісту папул або плазми крові підтверджує VZV незалежно від клінічної картини
• постгерпетична невралгія: після зникнення висипань при оперізувальному герпесі больовий синдром зберігається – нерідко до місяця і більше. На цьому етапі серологічні маркери гострої фази знижуються. Саме ПЛР у період активної реплікації є найбільш достовірною для підтвердження VZV-етіології болю
• імунодефіцит: у пацієнтів з імунодефіцитом вироблення антитіл порушене – серологічні тести можуть давати хибнонегативні результати при реальній активній інфекції. ПЛР не залежить від імунного статусу пацієнта

Біоматеріали та їхнє діагностичне значення

Широкий вибір біоматеріалів для ПЛР на VZV дозволяє адаптувати діагностику до конкретної клінічної ситуації.

• вміст папул і везикул – оптимальний матеріал при шкірних проявах. За наявності активних висипань – везикул, папул – вміст пухирців є найбільш інформативним матеріалом. Концентрація вірусної ДНК у везикулярній рідині є максимальною в період активного висипання. Результат забезпечує найбільшу чутливість ПЛР. Оптимально забирати матеріал у перші дні висипань – до утворення кірочок
• плазма крові – при системних формах та імунодефіциті. При дисемінованій формі вітряної віспи – коли вірус поширюється гематогенно з ураженням внутрішніх органів – плазма крові є кращим біоматеріалом. Інформативна при VZV-пневмонії, VZV-енцефаліті, VZV-гепатиті. При імунодефіциті – найбільш достовірний метод оцінки системного вірусного навантаження
• слина – зручний неінвазивний варіант. VZV активно виділяється зі слиною в період первинної інфекції. Неінвазивний спосіб забору – особливо цінний при педіатричній діагностиці, коли венепункція є небажаною. Інформативна при первинній вітряній віспі; менш переважна при атипових системних формах порівняно з плазмою
• сеча – додатковий біоматеріал. Використовується як додатковий матеріал при комплексному обстеженні. Наявність вірусної ДНК у сечі може свідчити про ураження нирок або системне поширення інфекції

Показання до призначення аналізу ПЛР до герпесвірусу 3 типу

Аналіз призначається інфекціоністом, терапевтом, педіатром, неврологом і дерматологом.

При вітряній віспі:

• нетиповий перебіг з атиповими висипаннями – диференціальна діагностика від інших екзантем: кору, краснухи, ентеровірусної інфекції, алергічної реакції
• важкий перебіг у дорослих з ускладненнями – пневмонія, енцефаліт, гепатит – підтвердження VZV як збудника органного ураження
• вітряна віспа у пацієнтів з імунодефіцитом – при нетипових та дисемінованих формах
• ранні терміни захворювання до формування детектованого рівня антитіл

При оперізувальному герпесі:

• симптоми оперізувального герпесу – підтвердження VZV-етіології
• атипові форми без класичних везикул або з нетиповою локалізацією
• офтальмологічний оперізувальний герпес – при ураженні рогівки
• синдром Рамсея-Ханта – біль у слуховому проході, втрата слуху
• постгерпетична невралгія – підтвердження VZV-етіології больового синдрому, що зберігається

Інтерпретація результатів аналізів ПЛР до герпесвірусу 3 типу

Аналіз є якісним – результат виражається як «виявлено» або «не виявлено».

• «Не виявлено» – ДНК вірусу Varicella Zoster у досліджуваному матеріалі не виявлено. Активної реплікації VZV у даному біоматеріалі немає. При збереженні симптомів та клінічній підозрі на VZV – дослідження іншого біоматеріалу або повторний аналіз через 3–5 днів при наростанні симптомів.
• «Виявлено» – ДНК VZV виявлено. Вірус активно реплікується в досліджуваному матеріалі. Діагноз вітряної віспи або оперізувального герпесу підтверджено. Потрібна консультація спеціаліста для визначення тактики лікування з урахуванням клінічної ситуації та імунного статусу.

Вибір біоматеріалу впливає на інтерпретацію:

Позитивний результат у вмісті везикул підтверджує шкірну форму VZV-инфекції. Позитивний результат у плазмі при негативному у везикулах указує на системне поширення. При імунодефіциті негативний результат у слині не виключає системної інфекції – кращою є плазма.

Підготовка до аналізу ПЛР до герпесвірусу 3 типу

Спеціальної підготовки не потрібно. При заборі слини – не їсти, не пити і не чистити зуби за 1 годину до дослідження. При заборі вмісту папул – забір проводиться медичним персоналом з активних нерозкритих або свіжих везикул.

Часті запитання про аналіз ПЛР до герпесвірусу 3 типу

• Коли краще використовувати ПЛР, а коли аналіз на антитіла при діагностиці VZV? ПЛР є кращою на ранніх термінах захворювання – до формування антитіл; при нетиповій клініці; при імунодефіциті з порушенням вироблення антитіл; при атипових формах оперізувального герпесу. Антитіла – для оцінки імунного статусу при плануванні вагітності та для підтвердження гострої інфекції на пізніших термінах.
• Який біоматеріал обрати при оперізувальному герпесі? За наявності свіжих везикул – вміст папул забезпечує максимальну чутливість. При відсутності чітких висипань або при постгерпетичній невралгії – плазмі крові для виявлення системного вірусного навантаження.
• Чи інформативна ПЛР при оперізувальному герпесі без висипань? Так – при атипових формах без чітких везикул дослідження плазми крові виявляє вірусну ДНК при активній реактивації. Саме в цих ситуаціях ПЛР є незамінною – серологія може бути неоднозначною.
• Чи потрібна ПЛР при типовій клінічній картині вітрянки у дитини? При класичній картині у дитини лабораторне підтвердження зазвичай не потрібне. ПЛР показана при нетиповому перебігу, важких ускладнених формах, при діагностичній невизначеності або при необхідності документального підтвердження діагнозу.

ПЛР Real-Time на вірус Varicella Zoster у плазмі крові, слині, сечі та вмісті папул – найбільш точний метод прямого підтвердження VZV-інфекції, що перевершує серологічні методи за швидкістю виявлення та незалежністю від імунного статусу пацієнта. Широкий вибір біоматеріалів забезпечує гнучкість діагностики – від неінвазивного дослідження слини при педіатричній діагностиці до дослідження плазми при системних формах у пацієнтів з імунодефіцитом. У МЦ «Альтернатива» аналіз проводиться у складі комплексного обстеження – з консультацією спеціаліста та інтерпретацією результату в контексті клінічної картини та імунного статусу.

Матеріал для дослідження – плазма венозної крові, слина, сеча або вміст папул і везикул. Вибір біоматеріалу визначається клінічною ситуацією: при шкірних проявах – вміст везикул; при системних формах або імунодефіциті – плазма крові; при педіатричній діагностиці – слина як неінвазивна альтернатива.

Метод дослідження – ПЛР Real-Time (полімеразна ланцюгова реакція в режимі реального часу), якісне визначення. Високочутливий молекулярно-генетичний метод, що виявляє специфічні фрагменти ДНК Varicella Zoster Virus при мінімальній концентрації збудника – є інформативним з перших днів клінічних проявів.

Термін виконання – 3 робочих дні.

Статті про діагностику та лікування вірусу зостер