Протозойні кишкові інвазії (Giardia lamblia, Blastocystis hominis, Dientamoeba fragilis, Isospora belli, Cryptosporidium parvum, Entamoeba histolytica), кал, методом ПЛР, якісне визначення

Протозойні кишкові інвазії – аналіз методом ПЛР з якісним визначенням шести збудників у калі – один із найточніших та інформативніших методів діагностики паразитарних інфекцій травного тракту. Стандартний аналіз калу на яйця глистів та цисти найпростіших нерідко дає хибнонегативний результат – цисти та ооцисти виділяються непостійно, і при одноразовому дослідженні їх легко пропустити. ПЛР-метод принципово відрізняється: він шукає не самих паразитів, а фрагменти їхнього генетического матеріалу – ДНК. Це забезпечує високу чутливість навіть при мінімальному паразитарному навантаженні.

У Медичному центрі «Альтернатива» аналіз на протозойні кишкові інвазії методом ПЛР входить до програми комплексного паразитологічного обстеження – як за наявності симптомів, так і в межах скринінгу на КМЕ при з’ясуванні причин хронічних порушень травлення, алергічних захворювань та зниження імунітету.

Що таке протозойні кишкові інвазії

Найпростіші – одноклітинні паразитичні мікроорганізми – є однією з найпоширеніших причин хронічних порушень травлення у дітей та дорослих. На відміну від гельмінтів, яких видно неозброєним оком, найпростіші мікроскопічно малі та виявляються лише лабораторними методами.

Найпростіші паразитують у різних відділах травного тракту – від тонкого кишківника до товстої кишки. Вони прикріплюються до слизової, порушують нормальне всмоктування поживних речовин, пошкоджують епітелій та викликають запалення. При тривалому паразитуванні формуються нутрієнтні дефіцити, порушується нормальна мікробіота, знижується імунна відповідь слизових оболонок.

Шляхи зараження: фекально-оральний – через інфіковану воду та їжу, через руки при недотриманні гігієни. Діти особливо уразливі – спалахи протозоозів у дитячих садках та школах є поширеним явищем. Окрема група ризику – люди, які повернулися з країн із теплим кліматом та низьким рівнем санітарії.

Які збудники визначає аналіз

Панель включає шість найбільш клінічно значущих кишкових найпростіших.

• Giardia lamblia (лямблія) – збудник лямбліозу. Найбільш поширений кишковий найпростіший у всьому світі. Паразитує в тонкому кишківнику, прикріплюючись до ворсинок. При тривалому лямбліозі розвивається атрофія ворсинок, порушується всмоктування жирів, жиророзчинних вітамінів, заліза, B12, цинку. У дітей лямбліоз нерідко перебігає субклінічно – без яскравих симптомів, але з хронічними нутрієнтними дефіцитами та порушенням імунної відповіді.
• Blastocystis hominis (бластоциста) – збудник бластоцистозу. Один із кишкових найпростіших, які виявляються найчастіше. Клінічне значення варіює – при високому навантаженні викликає хронічну діарею, здуття, болі в животі. При імунодефіциті перебігає важко. Нерідко поєднується із синдромом подразненого кишківника.
• Dientamoeba fragilis – збудник дієнтамебіазу. Паразитує в товстому кишківнику. Нерідко перебігає з болями в животі, діареєю, підвищеною стомлюваністю. Часто не виявляється стандартними методами – ПЛР значно інформативніша.
• Isospora belli – збудник ізоспорозу. Особливо небезпечний для імуноскомпрометованих осіб. При нормальному імунітеті може перебігати субклінічно. При імунодефіциті викликає важку діарею з порушенням всмоктування.
• Cryptosporidium parvum – збудник криптоспоридіозу. Паразитує в тонкому та товстому кишківнику. Стійкий до хлорування водопровідної води – часта причина водних спалахів. У імунокомпетентних осіб – самообмежувальна діарея. У імунодефіцитних та дітей перших років життя – важкий перебіг із вираженою дегідратацією.
• Entamoeba histolytica (дизентерійна амеба) – збудник амебіазу (амебної дизентерії). Найбільш патогенний із шести збудників. Інвазує слизову оболонку товстого кишківника, викликаючи виразковий амебний коліт. При дисемінації – амебний абсцес печінки. Широко поширена в тропічних та субтропічних регіонах.

Переваги ПЛР-методу перед мікроскопією

Традиційна мікроскопія калу на цисти та ооцисти найпростіших – доступний, але ненадійний метод. Його головні обмеження: цисти виділяються переривчасто – при дослідженні в «тихий» період результат буде хибнонегативним. Вимагає високої кваліфікації лаборанта – цисти різних видів важко відрізнити візуально. Чутливість одноразового дослідження – 30–50% для більшості збудників.

ПЛР-метод позбавлений цих обмежень. Генетичний матеріал паразита присутній у калі безперервно при активній інвазії – незалежно від фази виділення цист. ПЛР виявляє специфічні послідовності ДНК кожного збудника – видова ідентифікація абсолютно точна. Чутливість – вище 95% для всіх шести збудників при правильному зборі матеріалу.

Одночасне визначення шести збудників в одному дослідженні – значна перевага: нерідко виявляється поєднана інвазія кількома найпростішими одночасно.

Показання до призначення аналізу на протозойні кишкові інвазії

Аналіз призначається гастроентерологом, інфекціоністом, педіатром, терапевтом або сімейним лікарем.

Клінічні показання:

• діарея, що утримується понад 2 тижні – стандартні бактеріологічні посіви негативні
• хронічні болі в животі та здуття без встановленої причини
• нудота, зниження апетиту, втрата ваги
• кров або слиз у калі
• порушення випорожнень після повернення з тропічних країн
• синдром подразненого кишківника при підозрі на паразитарну причину

Епідеміологічні показання:

• контакт з інфікованою людиною – у сім’ї, дитячому колективі
• спалах кишкових інфекцій в організованому колективі
• вживання води з відкритих джерел або сирих продуктів у регіонах із високою поширеністю протозоозів
• перебування в країнах із теплим кліматом та низьким рівнем санітарії

Діагностичні та контрольні показання:

• контроль ефективності лікування протозойних інвазій
• обстеження в межах скринінгу на КМЕ при хронічних порушеннях травлення, алергічних захворюваннях, імунодефіциті
• профілактичне обстеження дітей дошкільного віку з організованих колективів

Інтерпретація результатів аналізу на протозойні кишкові інвазії

Аналіз є якісним – результат виражається як «виявлено» або «не виявлено» щодо кожного з шести збудників.

• «Не виявлено» за всіма збудниками – генетичний матеріал найпростіших у калі не виявлено. Інвазія кишковими найпростішими з цієї панелі відсутня.
• «Виявлено» за будь-яким зі збудників – генетичний матеріал відповідного найпростішого виявлено. Пацієнт інфікований цим збудником. При виявленні Entamoeba histolytica – показана термінова консультація інфекціоніста з огляду на високу патогенність.

Важливі нюанси інтерпретації:

• Позитивний результат за Blastocystis hominis вимагає клінічної оцінки – цей організм у частини людей є умовно-патогенним і не завжди викликає симптоми. Клінічне значення визначається у зв’язці з симптомами пацієнта.
• Негативний результат при збереженні симптомів не виключає паразитарної причини – можливе інфікування збудниками, що не входять до цієї панелі (гельмінти, інші найпростіші). У цьому випадку необхідне розширення обстеження.

Часті запитання про аналіз на протозойні кишкові інвазії

• Чи потрібно здавати цей аналіз, якщо стандартний аналіз калу негативний? Так – при збереженні симптомів. Стандартна мікроскопія пропускає найпростіших у 50–70% випадків при одноразовому дослідженні. ПЛР значно точніша і виявляє інвазію при негативній мікроскопії.
• Чи можна здавати аналіз при прийомі антипаразитарних препаратів? Ні – для контролю ефективності лікування аналіз здається не раніше ніж через 2–4 тижні після завершення курсу. На тлі прийому препаратів результат може бути хибнонегативним.
• Що робити при виявленні Entamoeba histolytica? Негайно звернутися до інфекціоніста – дизентерійна амеба є найбільш патогенним збудником із панелі та вимагає специфічного лікування. Зволікання з лікуванням підвищує ризик важких ускладнень – амебного абсцесу печінки.
• Чи потрібно обстежувати всю родину при виявленні кишкових найпростіших у одного члена сім’ї? Так – більшість кишкових найпростіших передаються фекально-оральним шляхом і легко поширюються в побутових умовах. При виявленні лямбліозу або криптоспоридіозу обстеження всіх членів родини обов’язкове.

ПЛР-аналіз на шість кишкових найпростіших – найінформативніший із доступних методів діагностики протозойних кишкових інвазій. Одночасне виявлення Giardia lamblia, Blastocystis hominis, Dientamoeba fragilis, Isospora belli, Cryptosporidium parvum та Entamoeba histolytica в одному дослідженні дає повну картину протозойного навантаження – при точності, недосяжній для стандартної мікроскопії. У МЦ «Альтернатива» цей аналіз застосовується як самостійне дослідження при кишкових симптомах і як частина комплексного паразитологічного скринінгу – з подальшою консультацією фахівця та за необхідності складанням програми корекції виявленого навантаження.

• Матеріал для дослідження – зразок калу. Збирається в спеціальний стерильный контейнер із ложечкой для забору; важливо уникати потрапляння сечі в зразок та дотримуватися тридобового періоду відміни проносних і ректальних препаратів перед збором.
• Метод дослідження – полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР), якісне визначення. Високочутливий молекулярно-генетичний метод, що виявляє специфічні фрагменти ДНК кожного з шести збудників – забезпечує точну видову ідентифікацію при чутливості вище 95%.
• Термін виконання – 3 робочих дні.

Статті про діагностику та лікування кишкових інвазій