Опис
Герпесвірус 6 типу (HHV-6), ПЛР Real-Time – аналіз, що виявляє ДНК вірусу безпосередньо в біологічному матеріалі – урогенітальному зішкрібі, сечі або біоптаті. На відміну від серологічного дослідження на IgG, яке лише підтверджує факт колись перенесеної інфекції, ПЛР визначає активну присутність вірусу в конкретній тканині або біологічній рідині прямо зараз.
Ця принципова відмінність є особливо значущою при діагностиці реактивації HHV-6 у імунокомпрометованих пацієнтів, при диференціальній діагностиці дитячих екзантем, при підготовці до трансплантації та при пошуку причин інфекційного мононуклеозу з негативним тестом на вірус Епштейна-Барр. Метод Real-Time забезпечує високу чутливість – виявляє поодинокі копії ДНК вірусу навіть при мінімальному вірусному навантаженні. У МЦ «Альтернатива» ПЛР-аналіз на HHV-6 застосовується у складі комплексного обстеження при оцінці вірусного навантаження та діагностиці хронічних інфекційних станів.
Що таке HHV-6 і чому його пряме виявлення методом ПЛР є важливим
Вірус герпесу людини 6 типу – широко поширений герпесвірус, представлений двома видами: HHV-6A і HHV-6B. HHV-6B зустрічається значно частіше і є збудником дитячої розеоли. HHV-6A виявляється переважно у пацієнтів з імунодефіцитами – його клінічне значення досліджується.
Первинне зараження відбувається, як правило, у віці до двох років – зазвичай повітряно-крапельним шляхом. Можлива також передача через трансплантовані органи, перелиту кров, нестерильні медичні інструменти та від матері до дитини під час виношування.
Після первинного зараження вірус довічно персистує в латентній формі в лімфоцитах і моноцитах – клітинах крові, які є його основним резервуаром. При зниженні імунного контролю вірус реактивується.
Чому серології недостатньо при підозрі на активну інфекцію:
Позитивний IgG до HHV-6 виявляється у більшості дорослих – це відображає лише факт перенесеної інфекції в дитинстві. Він не відповідає на запитання, чи активний вірус зараз. ПЛР відповідає саме на це запитання: виявляє ДНК вірусу при його активній реплікації в тканині або біологічній рідині – незалежно від імунного статусу та незалежно від наявності антитіл.
Клінічні ситуації, при яких ПЛР на HHV-6 є незамінною
- дитяча розеола та диференціальна діагностика: класична дитяча розеола – раптова екзантема – характеризується підвищенням температури до 39–40°C тривалістю 3–4 днів із подальшою появою висипу, що нагадує коровий або краснушний. Саме зовнішня подібність висипу нерідко призводить до помилкового діагнозу. ПЛР дозволяє підтвердити HHV-6 як збудник і виключити кір та краснуху – що особливо важливо у нещеплених дітей
- первинне інфікування дорослих: первинна HHV-6 інфекція у дорослих – рідкість, але при її виникненні клініка є більш важкою. Може проявлятися синдромом інфекційного мононуклеозу – лихоманка, лімфаденопатія, гепатоспленомегалія – при негативному тесті на вірус Епштейна-Барр. У ряді випадків можливий розвиток фульмінантного гепатиту
- реактивація при імунодефіциті: при ВІЛ-інфекції, після трансплантації органів та кісткового мозку, при імуносупресивній терапії реактивація HHV-6 є серйозним ускладненням. Може уражати ЦНС – викликати енцефаліт, когнітивні порушення, судомний синдром. Ураження трансплантованого органа. ПЛР у цих ситуаціях є методом підтвердження активної інфекції
- неврологічні ускладнення: при менінгіті або енцефаліті неясної етіології ПЛР ліквору або крові на HHV-6 дозволяє виключити або підтвердити вірусну етіологію ураження ЦНС
Показання до призначення аналізу ПЛР (зішкріб, сеча, біоптат) до герпесвірусу 6 типу
Аналіз призначається педіатрами, інфекціоністами, неврологами, гінекологами, хірургами та гематологами.
Педіатричні показання:
- диференціальна діагностика інфекційних захворювань у дітей з лихоманкою та висипом – розмежування дитячої розеоли від кору, краснухи, алергічної реакції;
- лихоманка неясного генезу у дітей раннього віку.
Інфекційні показання:
- інфекційний мононуклеозоподібний синдром при негативному тесті на вірус Епштейна-Барр;
- гепатит неясної етіології у дорослих при первинному зверненні;
- лімфаденопатія без встановленої причини.
Трансплантаційні показання:
- підготовка донорів і реципієнтів до пересадки органів – оцінка вірусного статусу обох;
- моніторинг реактивації HHV-6 у постпересадковому періоді;
- контроль ефективності противірусного лікування при активній HHV-6 інфекції.
Імунодефіцитні стани:
- діагностика асоційованих вірусних інфекцій у ВІЛ-інфікованих пацієнтів;
- пошук інфекційних причин органних уражень при імунодефіциті.
Неврологічні показання:
- енцефаліт або менінгіт неясної етіології – виключення HHV-6 як збудника.
Інтерпретація результатів аналізу ПЛР (зішкріб, сеча, біоптат) до герпесвірусу 6 типу
Аналіз є якісним – результат виражається як «виявлено» або «не виявлено».
- «Не виявлено» – ДНК HHV-6 у досліджуваному матеріалі не виявлено. Активної реплікації вірусу в даній тканині або рідині немає. Важливе застереження: негативний результат в урогенітальному зішкрібі або сечі не виключає присутності вірусу в клітинах крові – лімфоцитах і моноцитах, які є його основним резервуаром. При підозрі на системну реактивацію необхідне ПЛР-дослідження плазмиі крові
- «Виявлено» – ДНК HHV-6 виявлено. Вірус активно реплікується в досліджуваній тканині. За наявності клінічної картини – потрібна консультація інфекціоніста та оцінка необхідності противірусного лікування. Клінічна значущість позитивного результату оцінюється в контексті імунного статусу та симптомів
Підготовка до аналізу ПЛР (зішкріб, сеча, біоптат) до герпесвірусу 6 типу
Перед взяттям урогенітального мазка чоловікам бажано утриматися від сечовипускання 1,5–2 години. Жінкам мазок здається до настання менструації або після її закінчення.
Часті запитання про аналіз ПЛР (зішкріб, сеча, біоптат) до герпесвірусу 6 типу
- Чим ПЛР на HHV-6 краща за аналіз на IgG? IgG підтверджує факт колись перенесеної інфекції – це нормально для більшості дорослих. ПЛР виявляє активну реплікацію вірусу прямо зараз – у конкретній тканині. При підозрі на активну реактивацію ПЛР є єдиним методом прямого підтвердження.
- Чому при негативній ПЛР сечі або зішкрібу рекомендують ПЛР крові? Основний резервуар HHV-6 – лімфоцити та моноцити крові. При системній реактивації вірус може активно реплікуватися в клітинах крові за відсутності в урогенітальному тракті. Для оцінки системного вірусного навантаження ПЛР плазми або клітині крові є більш інформативною.
- Чи потрібно лікувати HHV-6 при позитивній ПЛР? Рішення приймається лікарем з урахуванням імунного статусу, симптомів та клінічного контексту. У імунокомпетентних пацієнтів лікування, як правило, не потрібне. При реактивації на тлі імунодефіциту або після трансплантації – лікування призначає інфекціоніст.
- Чи може HHV-6 викликати урогенітальні симптоми? Прямий зв’язок HHV-6 з урогенітальними симптомами не є доведеним – на відміну від ВПГ-2. Дослідження урогенітального зішкрібу або сечі на HHV-6 застосовується в межах комплексного обстеження при невстановленій причині запалення або при пошуку системного вірусного навантаження.
ПЛР Real-Time на HHV-6 – метод прямого виявлення вірусної ДНК, що дозволяє відповісти на запитання про активну реплікацію вірусу там, де серологічний тест дає лише інформацію про давній контакт із збудником. Незамінний при диференціальній діагностиці дитячих екзантем, при реактивації HHV-6 на тлі імунодефіциту, при підготовці до трансплантації та при моніторингу ефективності противірусного лікування. У МЦ «Альтернатива» аналіз проводиться у складі комплексного обстеження – з консультацією фахівця та інтерпретацією результату в контексті клінічної картини.
Матеріал для дослідження – урогенітальний мазок, сеча або біоптат залежно від передбачуваної локалізації та клінічного завдання. При підозрі на системну реактивацію оптимальним є дослідження плазми крові – клітини крові є основним резервуаром HHV-6.
Метод дослідження – ПЛР Real-Time (полімеразна ланцюгова реакція в режимі реального часу), якісне визначення. Високочутливий молекулярно-генетичний метод, що виявляє специфічні фрагменти ДНК HHV-6 при мінімальній концентрації вірусу в біологічному матеріалі.
Термін виконання – 3 робочих дні.